人胃腺癌细胞 （AGS）

人胃腺癌细胞 (AGS)
细胞介绍：
细胞株源自一个未经治疗的切除肿瘤碎块。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】F12K培养基(F12K:SIGMA)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。
2.培养条件：气相：空气，95%;二【èr】氧【yǎng】化【huà】碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用现配。液氮储【chǔ】存【cún】。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬【xuán】液的冻存管在【zài】37°C水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养【yǎng】基【jī】混合均匀。在1000RPM条件下离【lí】心【xīn】4分【fèn】钟，弃【qì】去上清【qīng】液，补加l-2mL培养基后吹匀。然【rán】后将所有细胞悬液加入培【péi】养【yǎng】瓶中【zhōng】培养过夜（或将细胞【bāo】悬液加【jiā】入l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天【tiān】换液【yè】并【bìng】检查细胞【bāo】密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人胃腺癌细胞 (AGS)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：弃去培养上清，用不含钙【gài】、镁【měi】离子的PBS润洗细胞9-21次。力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培【péi】养瓶中，置于【yú】37°C培养箱中消化9-21分钟，然【rán】后在显微镜【jìng】下【xià】观察细胞【bāo】消【xiāo】化情况，若【ruò】细【xì】胞大部分变【biàn】圆并脱落，迅速【sù】拿回操作台【tái】，轻【qīng】敲几下培养瓶后【hòu】加少【shǎo】量培养基终止消【xiāo】化。按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸【xī】出【chū】，在【zài】1000RPM条件下离心4分【fèn】钟，弃【qì】去上【shàng】清液【yè】，补加l-2mL培养液后吹【chuī】匀。将细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例分到新的含8ml培养基的新【xīn】皿【mǐn】中或者【zhě】瓶中。
 
细胞冻存：待细胞【bāo】生长状态良【liáng】好时，可进行细【xì】胞冻存。贴壁细胞冻【dòng】存时，弃去【qù】培养基后加入少量胰酶，细【xì】胞变【biàn】圆脱【tuō】落后，加入约【yuē】lml含血清的培养基后加入【rù】冻存管中，再添加1〇%DMSO后进【jìn】行【háng】冻存【cún】。
 
注意事项：
收到细胞后，若发现干冰己挥发干净、冻存【cún】管瓶盖脱落、破【pò】损及细胞有【yǒu】污染【rǎn】，请【qǐng】立 即与【yǔ】我们电【diàn】联。
所有【yǒu】动【dòng】物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二【èr】级生【shēng】物安全台内【nèi】操作，并请【qǐng】注 意【yì】防护，所有废液及接触【chù】过此【cǐ】细胞的【de】器皿需要灭【miè】菌后方【fāng】能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：胃癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人胃腺癌细胞 (AGS)运输和保存【cún】：使用含有胎牛血【xuè】清的2ml冻存【cún】管发送存活细胞。收到【dào】细【xì】胞后， 可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操【cāo】作【zuò】台弃去上清，加【jiā】入推荐 使用的【de】培【péi】养【yǎng】基后转移至【zhì】l〇cm培【péi】养皿或者T25培养瓶中【zhōng】培养，传代达到细胞【bāo】生长 状态良好【hǎo】时，再进行冻【dòng】存。具体【tǐ】操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。