moc1/moc2小鼠

moc1/moc2小鼠

细胞品系 : C57BL/6 Cxcr3-/-

细胞来源 : 国外

细胞鉴定 : STR鉴定已通过

细胞形态 : 淋巴母多角形细胞样,贴壁+悬浮生长

培 养 基 : DMEM(含【hán】NaHCO3 1.5g/L)(BasMed-AW-013)+FBS 10% + P/S1%500ML培养基：IMDM:F10/F12=2:1313ml:157ml培养【yǎng】基+FBS10%(50ml）+2.5mg/500ml胰岛素【sù】+20ug/500ml+2.5ug/500ml EGF+ P/S  1% 双抗，1%。

培养条件 :  气【qì】相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度【dù】为【wéi】70%-80%

贴壁细胞

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。

2. 加入【rù】0.25％(w / v） EDTA于培养【yǎng】瓶中(T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于【yú】37℃培养箱中消化9-21分【fèn】钟(难消化【huà】的细胞可以【yǐ】适【shì】当延【yán】长消化时间），然后在显微镜下观【guān】察细【xì】胞消化情况【kuàng】，若细胞大部分

变【biàn】圆并脱落，迅速拿回操作【zuò】台，轻敲【qiāo】几下【xià】培养瓶【píng】后加入3-4ml含10%FBS的培养【yǎng】基来终止消【xiāo】化。

3. 轻轻打匀后吸【xī】出【chū】，在1000RPM条件下【xià】离心3-5min，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹【chuī】匀。将【jiāng】细【xì】胞悬液按1：2的比例分到新【xīn】T25瓶/6cm培养【yǎng】皿中，添加6-8ml按照说明书要求配置的新的以保【bǎo】持细胞的

生长活力，后续传代根据实际情况按1:2~1:5的比例进行。

4. 细胞冻存: 收到细胞后建议在培【péi】养前3代【dài】时冻存一【yī】批细胞【bāo】种【zhǒng】子以备后续实验使【shǐ】用。

5. 运【yùn】输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培【péi】养【yǎng】细胞，请换用按照【zhào】说明【míng】书【shū】细胞培养条件新配制【zhì】的【de】来培养细【xì】胞。

细胞用途 : 仅供科研使用

注意事项

1. 建议加入0.25%EDTA的去【qù】后充分混匀所有细【xì】胞都接【jiē】触到，放置【zhì】到培养箱进行消化，时【shí】长大【dà】约是9-21分钟【zhōng】左【zuǒ】右后拿【ná】出来

2. 在培【péi】养器皿的侧边进行拍打帮助细胞脱落，拍打【dǎ】过【guò】程大约持续【xù】2分钟左右才会【huì】脱落大部分细胞，如果脱落【luò】比【bǐ】例【lì】还不是很【hěn】多，也可以【yǐ】重新放回培养箱继续消化9-21分钟后再次拿出【chū】来进行拍打脱【tuō】落，等9-21%细胞都【dōu】脱落后再终止消化【huà】，离【lí】心重【chóng】悬再重新【xīn】铺【pù】瓶【píng】，分散均匀。

3. MOC2细胞【bāo】贴壁性和常规细胞类似没【méi】有特【tè】别牢固。倍【bèi】增周期也没有MOC1快。采【cǎi】用常【cháng】规【guī】消【xiāo】化方法处理。

常温发货

收到后T25瓶消毒再放置培养箱静置9-21小时后观察密【mì】度和状【zhuàng】态拍照9-21张反馈给销【xiāo】售，密度达【dá】标就可以传代。前期【qī】传代比例【lì】1:2，等再次【cì】长满后传代时建【jiàn】议冻【dòng】存【cún】其中一整【zhěng】瓶成1个【gè】1ml冻存管【guǎn】，另外一瓶【píng】继续传代【dài】，反复冻存9-21只后才扩增做实验，以【yǐ】防【fáng】突发情【qíng】况引起断种。

干冰发货

常规细胞发货冻【dòng】存管2只，复【fù】苏【sū】1只，另外【wài】一只【zhī】备用，均没有【yǒu】复【fù】苏成功的情况即时留存复【fù】苏照片通知我们。

生物安全

1. 所有动【dòng】物【wù】细胞均视为【wéi】有潜在【zài】的【de】生物危害性，必【bì】须【xū】在二级生物安全【quán】台【tái】内操作，并请注意防护，所有废液及接【jiē】触过此细【xì】胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

2. 建议在复苏冻存细胞时【shí】始终使【shǐ】用防护手套、衣服和戴上防护面罩。注意【yì】：冻存管浸没在【zài】液氮中会泄漏【lòu】，并会慢慢充【chōng】满液氮。解冻时，液氮转化成气【qì】相可【kě】能【néng】导致容器爆炸【zhà】或用危【wēi】险力吹掉其盖子，从【cóng】而产生飞扬的【de】碎【suì】屑【xiè】造【zào】成人员伤害【hài】。

悬浮细胞

悬浮状【zhuàng】态下生长的【de】细胞，可以【yǐ】通过向培养瓶中添【tiān】加培养基来维持【chí】细胞的生长状态，一【yī】般情【qíng】况【kuàng】下细胞密度【dù】维持在

1×10⁵~1×10⁶个/mL

(不同细胞对密度要求不同）可以维持细胞的正常生【shēng】长。如需分瓶可以将细胞悬液收集到离心管【guǎn】中1000rpm，离【lí】心5min，弃去【qù】上清，补加【jiā】1-2mL培养液后【hòu】重悬混匀后将细胞【bāo】悬液按1：2的比例分到新【xīn】T25瓶中，添加6-8ml按照说明书要【yào】求配置的【de】新的培养【yǎng】基【jī】以【yǐ】保持细胞的生长【zhǎng】活【huó】力，后续传【chuán】代【dài】根据实【shí】际情况【kuàng】按1:2~1:4的比例进行。