HEP-53.4 小鼠肝癌细胞

细胞名称：HEP-53.4 小鼠肝癌细胞

细胞别名 ：HEP-53.4 ; 53.4 ; 小鼠肝癌细胞

细胞来源 ：德国

细胞鉴定： STR鉴定已通过

细胞形态 ：上皮样细胞，贴壁生长

培 养 基 ：DMEM(含NaHCO3 1.5g/L)(BasMed-AW-013)+FBS 10% + P/S1%

培养条件 ：气相空气，95%；二氧【yǎng】化碳，5%。 温度：37摄氏度【dù】，培养箱湿【shī】度为70%-80%

冻存条件： 无血清冻存液，液氮储存

细胞背景：来源于【yú】 C57BL/6J小鼠的原发性肝细胞癌，这些小鼠肝细胞【bāo】忠实地代表了肝细【xì】胞【bāo】癌，并为研究这种类【lèi】型的肝癌【ái】提供【gòng】了有价值【zhí】的模型，同义词HEP-53.4和53.4，它【tā】们【men】便于识【shí】别和交叉引用，肝细胞癌是一个重【chóng】大的【de】健康【kāng】问【wèn】题，这些细胞能够对其分子【zǐ】通路、细胞相互【hù】作用和治疗策【cè】略进行精确研【yán】究，这【zhè】些细胞起【qǐ】源【yuán】于Mus musculus(小鼠【shǔ】)，为理解和开发肝细胞癌的治疗方法提供【gòng】了【le】相关的模型系【xì】统。

细胞用途 ：仅供科研使用

细胞货期：现货，1周左右

细胞事项

常温发货

收到后【hòu】T25瓶消毒再放置培养箱静【jìng】置9-21小时后【hòu】观【guān】察密度和状态拍照9-21张【zhāng】反馈给【gěi】销售，密度达标就可【kě】以传【chuán】代。前【qián】期传【chuán】代比例1:2，等再次长满后【hòu】传代时建议冻存其【qí】中一整瓶成1个1ml冻存管，另外一瓶继【jì】续传代，反复【fù】冻存9-21只后【hòu】才扩增做实验，以防突发【fā】情【qíng】况引【yǐn】起断种。

干冰发货

常规细【xì】胞发货冻存【cún】管2只【zhī】，复苏1只，另外一只备【bèi】用，第一个复苏不【bú】成功时严格按【àn】照厂家【jiā】要求【qiú】复苏第二个，均没有【yǒu】复苏成功的情况即【jí】时【shí】留存复苏照片【piàn】通知我们【men】。

注意事项

1. 常规消化收集细胞离心。

2. 离心后去掉离【lí】心【xīn】管内上【shàng】清，加【jiā】入1ml重悬细胞混匀，建议【yì】轻轻晃动或者轻【qīng】轻吹打细胞【bāo】， 放入培养箱消化细【xì】胞【bāo】，再消化1min左右【yòu】。

3. 消化好后，用【yòng】移液枪轻轻吹打细【xì】胞悬液，使【shǐ】细胞【bāo】团分散，迅【xùn】速【sù】加入3-5ml含血清的培养基混匀【yún】以终止【zhǐ】消化【huà】，。

5. 显【xiǎn】微镜下观察【chá】看细胞是否成均匀分散的单【dān】细【xì】胞【bāo】，若有少量成【chéng】团的小细胞团可不用【yòng】重新消【xiāo】化，使【shǐ】之贴壁后待细胞生长稳定【dìng】后再【zài】消散细胞。

4. 加入5ml左【zuǒ】右的【de】细【xì】胞相应【yīng】的培养基混匀，按【àn】比例接入培养瓶/皿中【zhōng】。

贴壁细胞

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。

2. 加入0.25％(w / v） EDTA于【yú】培养瓶中(T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL），置于37℃培养箱中消【xiāo】化9-21分钟(难消化的细胞可以适当延长消化【huà】时间），然后在显微【wēi】镜【jìng】下【xià】观【guān】察细【xì】胞消化情况，若细【xì】胞大部分变圆并脱落【luò】，迅速【sù】拿【ná】回操作台，轻敲几【jǐ】下【xià】培养瓶后【hòu】加入【rù】3-4ml含10%FBS的【de】培养基来终止消【xiāo】化。

特别注意

该细胞在 DMEM(含【hán】 1.5g/LNaHCO3)培养基中生长良好【hǎo】，大部分的 DMEM 含有较 高浓度【dù】的 NaHCO3（3.7g/L），若使用 DMEM（3.7g/L NaHCO3）培养【yǎng】基培养细 胞时【shí】需【xū】要提【tí】高 CO2 浓【nóng】度（7%-10%）