人头颈鱗癌细胞 （Tu212）

人头颈鱗癌细胞 (Tu212)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备【bèi】 DMEM/F12 培养基(DMEM/F12:GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。
2.培养条件：气【qì】相：空气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培【péi】养【yǎng】箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现用【yòng】现配。液【yè】氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有【yǒu】lmL细胞悬液【yè】的冻【dòng】存管在37°C水浴中迅速摇晃【huǎng】解冻，加【jiā】入4mL培养【yǎng】基混合均匀【yún】。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬液【yè】加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液【yè】加入【rù】l〇cm皿中【zhōng】，加入约8ml培养基，培养【yǎng】过夜）。第二【èr】天换【huàn】液并【bìng】检【jiǎn】查【chá】细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人头颈鱗癌细胞 (Tu212)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去【qù】培养上【shàng】清，用不含钙、镁离子【zǐ】的PBS润洗细胞9-21次。力口2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培【péi】养【yǎng】箱中消化9-21分钟，然【rán】后在显【xiǎn】微镜下观察【chá】细胞消化情况，若细【xì】胞大部分变圆并脱落，迅速拿回【huí】操作台【tái】，轻敲几下【xià】培养瓶【píng】后加少量培【péi】养基终止消化【huà】。按6-8ml/瓶补加培【péi】养基，轻轻【qīng】打匀后吸出，在【zài】1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分钟，弃【qì】去上【shàng】清液，补【bǔ】加l-2mL培养液后吹匀【yún】。将细胞悬液按1: 2到1: 5的【de】比例【lì】分【fèn】到新【xīn】的【de】含8ml培养基的新皿中或【huò】者瓶中。
 
细胞冻【dòng】存：待【dài】细胞生长状【zhuàng】态良好【hǎo】时【shí】，可【kě】进【jìn】行细胞冻存。贴壁细【xì】胞冻存时，弃【qì】去培养基后加入少量胰酶，细胞变【biàn】圆脱落后，加【jiā】入约lml含血【xuè】清【qīng】的【de】培养【yǎng】基后 加入冻存管中，再添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
注意事项：
收到细胞后，若发现【xiàn】干冰【bīng】己挥发干净【jìng】、冻【dòng】存管瓶盖【gài】脱落【luò】、破损及【jí】细胞有污染，请立即与我们【men】电联。
所有动物细【xì】胞均视【shì】为有潜在【zài】的生物危害【hài】性，必须在二级生物安全【quán】台【tái】内操【cāo】作，并请注意防护，所有废液【yè】及接触过此细【xì】胞的器皿【mǐn】需要灭菌后方能【néng】丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：头颈鳞癌
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人头颈鱗癌细胞 (Tu212)运输和保存：使用含有胎牛【niú】血【xuè】清的2ml冻存管发送存活细胞【bāo】。收【shōu】到【dào】细【xì】胞【bāo】后，可在1000RPM，常温条件【jiàn】下，离【lí】心5min后，于洁净操作台弃【qì】去【qù】上清，加入推【tuī】荐使用的培养基后转移至l〇cm培【péi】养皿或者T75培养瓶【píng】中培养，传代【dài】达到细胞生长状【zhuàng】态良好时，再进【jìn】行冻【dòng】存【cún】。具体操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。