人食管癌细胞（TE-1）

人食管癌细胞(TE-1)
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培养【yǎng】基(RPIVM-1640:GIBCO,添【tiān】加【jiā】 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八，丙酮【tóng】酸钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。
2. 培养条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化【huà】碳，5%。温度：37摄【shè】氏度，培养箱【xiāng】湿度【dù】为70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用现【xiàn】配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将含有lmL细胞悬液的【de】冻存管在37°C水浴【yù】中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混【hún】合均匀。在【zài】1000RPM条【tiáo】件【jiàn】下离心4分【fèn】钟，弃去【qù】上清液【yè】，补加l-2mL培养基后吹匀。然后将所有细【xì】胞悬液加入培养瓶【píng】中【zhōng】培养过夜（或【huò】将【jiāng】细【xì】胞【bāo】悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养【yǎng】过夜）。第二【èr】天【tiān】换液并检【jiǎn】查细胞密【mì】度。
 
人食管癌细胞(TE-1)细胞【bāo】传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。弃去培养上【shàng】清，用不【bú】含钙、镁离【lí】子的PBS润洗细胞【bāo】9-21次。力口2m丨【shù】消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置【zhì】于【yú】37°C培养【yǎng】箱中消化9-21分钟【zhōng】，然后在显微【wēi】镜下观察细【xì】胞消化情【qíng】况，若细胞大部分变圆并脱落【luò】，迅速拿回操【cāo】作台，轻敲几下【xià】培养瓶后加少量培养基终止消化。按6-8ml/瓶补加培养基【jī】，轻轻打匀后吸出，在【zài】1000RPM条【tiáo】件下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补加【jiā】l-2mL培养液后吹匀。将细胞悬液按【àn】1: 2到1: 5的比【bǐ】例分到新【xīn】的含【hán】8ml培养基的【de】新皿中或者【zhě】瓶中。 
 
3)细胞冻【dòng】存：待【dài】细胞生长状态良好时，可进行细胞【bāo】冻【dòng】存。贴壁【bì】细胞冻存时，弃【qì】去培养基后加入少量胰【yí】酶，细胞变圆【yuán】脱落后，加入约lml含【hán】血清【qīng】的【de】培【péi】养基后加入冻存管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后进行冻【dòng】存。
 
注意事项：
收到细【xì】胞【bāo】后【hòu】，若发现干冰己【jǐ】挥发干净、冻存管瓶盖【gài】脱落、破损及细胞【bāo】有污染，请立即与我【wǒ】们电联。
所有动【dòng】物细【xì】胞均【jun1】视为有潜在的生物【wù】危害性，必须【xū】在二级【jí】生物安全台内操【cāo】作，并请注【zhù】意防护，所有【yǒu】废液及接触过此【cǐ】细胞的器皿需要灭【miè】菌后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：食管癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人食管癌细胞(TE-1)运输和保存：使用含【hán】有胎【tāi】牛血【xuè】清的2ml冻存管发送存活细胞。收到细胞【bāo】后， 可【kě】在1000RPM，常温条件下，离心5min后【hòu】，于【yú】洁净操作台弃【qì】去上清，加入推荐使用的【de】培养基后【hòu】转移至l〇cm培养皿或者T75培养【yǎng】瓶中【zhōng】培养【yǎng】，传代达到细胞生长【zhǎng】状态【tài】良好时，再【zài】进行冻存。具体【tǐ】操作见细胞培养步骤。
细胞用途：仅供使用。