大鼠肺泡巨噬细胞（NR8383）

大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)
细胞介绍
NR8383(正【zhèng】常大鼠，1983年【nián】)来【lái】源于肺【fèi】灌【guàn】洗时【shí】的正常大【dà】鼠肺泡巨噬细胞。细胞在gerbil肺【fèi】细胞【bāo】连续培养液【yè】存在下培养了大【dà】约9-21个【gè】月。随后，不再需要外源生长因【yīn】子。通过【guò】有限稀释【shì】法从单个细【xì】胞【bāo】克【kè】隆并亚克隆NR8383细胞，并三次用【yòng】软琼脂亚克隆。细胞表现出巨噬【shì】细胞的特性，吞噬酵母多糖和铜绿，非特异性脂酶【méi】活【huó】性，Fc受体，氧【yǎng】化降解；分泌IL-l,TGF-(3和IL-6,可【kě】重复地响应【yīng】外源生长【zhǎng】因【yīn】子。NR8383细【xì】胞响应博莱霉素，分泌TGF-0前【qián】体。在【zài】博莱霉素刺激下，TGF-(3mRNA表达也【yě】上升。细胞对【duì】内毒素敏感。9-21钠克【kè】/毫升的LPS水平【píng】抑【yì】制增生达50%。即使达到0.001毫克/毫升【shēng】的水平，LPS抑制还是无毒且在后续过程中可逆【nì】NR8383细胞株提供了高响应的肺泡【pào】巨噬细胞的均【jun1】一来源【yuán】，可以用于【yú】体外【wài】研究巨响细胞【bāo】相关活性。
 
细胞特性
1)来源：肺；巨噬细胞
2)形态：巨噬细胞，半悬浮生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)细胞接受后的处理：
1)收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2)请先在显微镜下确【què】认【rèn】细胞生长状【zhuàng】态，去【qù】掉封口【kǒu】膜并将T25瓶置【zhì】于37°C培养约2-3h〇
3)弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4) 如果细胞长【zhǎng】满（90%以上）请及时进行细胞传代【dài】，传代培养【yǎng】用6ml本公司【sī】附【fù】带的【de】*培养基。
5)接到细胞次日，请检【jiǎn】查细胞是否污染，若【ruò】发现污染【rǎn】或【huò】疑似污【wū】染，请及时与我们取得【dé】电【diàn】联【lián】。
 
细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
 
一.培养基及培养冻存条件准备：
1.准备F-12K培养基（F-12K，GIBCO)，90%;胎牛【niú】血清【qīng】，10%。
2.培养条件【jiàn】：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养【yǎng】箱湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
二.细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬液【yè】的冻存管迅速放入【rù】37°C水【shuǐ】浴中（水面要低于冻存管【guǎn】盖部【bù】）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基【jī】的【de】15ml离【lí】心管中混合均匀【yún】。在1000RPM条件【jiàn】下离心【xīn】4分【fèn】钟，弃去上清液，加入lmL培
养基后吹【chuī】匀。然后将所有细【xì】胞悬液移入含有5ml培养基【jī】的【de】培【péi】养瓶中培养【yǎng】过夜。第二天换液并【bìng】检查细【xì】胞密度。
 
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方【fāng】法【fǎ】一：收集细胞，1000RPM，常温【wēn】条件下离心5分钟，弃【qì】去上清液，补加l-2mL培养液后吹【chuī】句，将细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分到新的【de】含【hán】8ml培【péi】养基的新【xīn】皿中或者瓶中。（该细【xì】胞【bāo】建议使【shǐ】用*种方法，将所有细胞收集起来）
方法二：可【kě】选择半【bàn】数换液方式，弃【qì】去半数培【péi】养基后，将剩余【yú】细【xì】胞【bāo】悬起，将细胞悬液按1: 2到1: 3的比例分【fèn】到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
 
细胞冻存：待细胞生长状态良好【hǎo】时，可【kě】进【jìn】行细【xì】胞【bāo】冻存。悬【xuán】浮细【xì】胞冻存时，应将【jiāng】细胞收集，1000RPM，常温条件下【xià】离心5分钟【zhōng】，少量保存上清液（防【fáng】止细胞吸走)，加入部分新【xīn】鲜培养基，吹打【dǎ】均匀后，加【jiā】入【rù】到冻存管中，在冻存管【guǎn】
中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。
 
大鼠肺泡巨噬细胞(NR8383)注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现【xiàn】干冰己挥发干净【jìng】、冻存管瓶【píng】盖脱落【luò】、破损及细【xì】胞有污染，请立即【jí】与我们电联。
所有动物【wù】细胞均视为【wéi】有潜【qián】在的生【shēng】物危害性，必须【xū】在二【èr】级生物【wù】安全台【tái】内操作【zuò】，并请注意防护【hù】，所有废【fèi】液及【jí】接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。