大鼠回肠细胞（IEC-18）

大鼠回肠细胞(IEC-18)
细胞介绍该细胞来源于大鼠肠上皮细胞。
细胞特性
1)来源：大鼠肠上皮
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显【xiǎn】微镜【jìng】下确认细胞生长【zhǎng】状态，去掉封【fēng】口膜并将T25瓶【píng】置于37°C培养约【yuē】2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果【guǒ】细胞【bāo】长满（90%以上）请【qǐng】及时进行细胞传代，传代培养用【yòng】6ml本公司附带【dài】的*培养【yǎng】基。
5.接到细【xì】胞次日，请检查细胞是【shì】否污【wū】染【rǎn】，若发现污染或疑似污染，请及时与【yǔ】我【wǒ】们取得电联。
 
大鼠回肠细胞(IEC-18)细胞用途：
仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备DMEM培养基(DMEM，GIBCO)，95%;胎牛血清【qīng】，5%，添加0.1U/ml胰岛素。
2. 培养条件：气相【xiàng】：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37°C，培养【yǎng】箱湿度为【wéi】 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含【hán】有lmL细胞【bāo】悬液的冻存管迅速放入37°C水浴中（水【shuǐ】面【miàn】要低【dī】于冻存管盖部【bù】）摇晃解冻，移【yí】入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在【zài】1000RPM条件下【xià】离【lí】心4分钟，弃【qì】去上【shàng】清液，加入lmL培养基后吹匀。然【rán】后将所有【yǒu】细【xì】胞悬液移【yí】入含有【yǒu】5ml培【péi】养【yǎng】基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞【bāo】密度【dù】。
 
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对【duì】于贴【tiē】壁【bì】细胞，传【chuán】代可参考以【yǐ】下方法：弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细【xì】胞9-21次。 力口 2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶中【zhōng】，置于37°C培养箱【xiāng】中消化9-21分【fèn】钟，然后在显微镜下【xià】观察细胞消化情况，若【ruò】细胞【bāo】大部分变圆并脱【tuō】落【luò】，迅速拿【ná】回作台【tái】，轻敲【qiāo】几下培养瓶【píng】后加入3ml此细【xì】胞的培【péi】养基【jī】终止消化。轻轻【qīng】吹打后吸出，移【yí】入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟【zhōng】，弃去【qù】上清液，加入lmL培养液【yè】后吹匀【yún】。移入到【dào】事先准备好的含有5ml培养基【jī】的T-25培养【yǎng】瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培【péi】养。
 
细胞冻存：
待细胞生长状态良【liáng】好时，可【kě】进行细【xì】胞冻存。贴壁细胞冻存【cún】时，先要消【xiāo】化处【chù】理并进【jìn】行【háng】细胞计数。消化方法按照细胞传代方法【fǎ】的【de】9-21步骤进行，后的重悬液使用血【xuè】清。悬浮细胞直接计数后离心，用血【xuè】清重悬浮，加DMSO至【zhì】终浓度为10%。加入【rù】DMSO后迅速混匀【yún】，按每lml的数量分配到【dào】冻存管中。本【běn】公【gōng】司按每【měi】个冻存【cún】管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
 
大鼠回肠细胞(IEC-18)注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干冰己挥发干净【jìng】、冻【dòng】存管瓶盖脱落、破损【sǔn】及细胞有污【wū】染，请立即与【yǔ】我们电联。
所有动物【wù】细【xì】胞均视【shì】为有潜在的生物【wù】危害性，必【bì】须在二级生物安【ān】全台内操作，并【bìng】请注意防【fáng】护，所有废液及【jí】接触过【guò】此细胞的器皿需要灭【miè】菌后方能丢【diū】弃。