大鼠肝星形细胞（CFSC-8B）

大鼠肝星形细胞(CFSC-8B)
细胞介绍该细胞于原代末期冻存。
细胞特性
1)来源：大鼠肝脏
2)形态：贴壁生长
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请先在显微镜下确认细胞生长状【zhuàng】态，去掉【diào】封【fēng】口【kǒu】膜并将【jiāng】T25瓶置于37°C培养约2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如果细胞长满【mǎn】（90%以上）请【qǐng】及时【shí】进行细胞传代，传代培养用【yòng】6ml本公司【sī】附带的*培养【yǎng】基。
5.接到细胞次日，请检【jiǎn】查细胞是否污染，若发【fā】现污染或疑【yí】似污染，请及时【shí】与【yǔ】我【wǒ】们取得【dé】电【diàn】联。
 
大鼠肝星形细胞(CFSC-8B)细胞用途：仅供使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准【zhǔn】备DMEM培养基(DMEM，GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血清【qīng】，10%。
2. 培养条件：气相：空气，95%;二氧【yǎng】化【huà】碳，5%。温度：37°C，培养箱【xiāng】湿度为 70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
 
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细【xì】胞悬液的冻【dòng】存管迅速放入【rù】37°C水浴中（水面要低于冻存管盖【gài】部【bù】）摇晃解冻，移入事先准【zhǔn】备好【hǎo】的含有4mL培养基的【de】15ml离【lí】心管中混合均匀【yún】。
在1000RPM条件【jiàn】下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，加入lmL培养基后吹匀。然后将【jiāng】所有细胞悬液移入含【hán】有5ml培【péi】养【yǎng】基的培养瓶中培养【yǎng】过夜。
第二天换液并检查细胞密度。
 
细胞传【chuán】代【dài】：如果细胞密【mì】度达80%-90%，即可【kě】进行传代培养。对于贴【tiē】壁细胞，传代【dài】可参考以下方法：弃去培【péi】养【yǎng】上清，用不含【hán】钙、镁离子的PBS润【rùn】洗细胞9-20次。
 力口 2m丨消化【huà】液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培养箱【xiāng】中消化【huà】9-20分钟，然后在显微镜【jìng】下观察细胞消【xiāo】化情况【kuàng】，若细胞大【dà】部分变圆并脱【tuō】落，迅【xùn】速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加【jiā】入3ml此细【xì】胞的培养基终止消化。
轻【qīng】轻吹打后吸出【chū】，移【yí】入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上【shàng】清【qīng】液，加入lmL培养液【yè】后【hòu】吹匀。
移入到事先准备好的【de】含有5ml培【péi】养基【jī】的T-25培【péi】养瓶中或含【hán】有14ml培养【yǎng】基的T-75培养瓶中培养。
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
贴【tiē】壁细【xì】胞冻存时，先【xiān】要消化【huà】处理【lǐ】并进行【háng】细【xì】胞计【jì】数。消化方法按照细胞传代【dài】方法的9-20步骤进【jìn】行，后【hòu】的重悬液使【shǐ】用血清。悬浮细胞直接计数后离心，用血【xuè】清重悬浮，加DMSO至终【zhōng】浓度为10%。
加入DMSO后迅速混匀，按每lml的数量分配到冻存管中。
本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
 
大鼠肝星形细胞(CFSC-8B)注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发【fā】现干冰己挥发干净、冻存【cún】管瓶【píng】盖脱落、破损【sǔn】及【jí】细胞有污【wū】染，请立即与我们电联。
所【suǒ】有【yǒu】动物细胞均视【shì】为有【yǒu】潜在的生物危【wēi】害性【xìng】，必须在二级生物安全台内操作，并请【qǐng】注意防护，所【suǒ】有废液【yè】及接触过此细【xì】胞的器【qì】皿需要灭菌后方能丢弃。