人涎腺癌细胞（ACC-M）

人涎腺癌细胞(ACC-M)
细胞介绍：
ACC-M细胞【bāo】是ACC-2细胞系经体内外不断选择【zé】获得的【de】肺转移细胞株（ACC-2不【bú】形成肺转移），其【qí】裸鼠体内肺【fèi】转移率达96%。该【gāi】细胞株除【chú】保留【liú】了上皮和腺源【yuán】性的特性外【wài】，体外生长能【néng】力【lì】大大【dà】增强。己证【zhèng】明【míng】该细胞株是建立肺高转移性裸鼠模型的极 佳材料。
 
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640 培【péi】养基(RPIVM-1640:GIBCO，添加 NaHC031.5g八, D-葡【pú】萄糖2.5g八，丙酮【tóng】酸【suān】钠O.llg八)，90%;胎牛血清，10%。
2. 培养条件：气相：空【kōng】气【qì】，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱 湿【shī】度【dù】为【wéi】70%-80%。
3.冻存液：90%*培养基，10%DMSO,现【xiàn】用【yòng】现配。液【yè】氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将含有lmL细胞悬【xuán】液的【de】冻存管【guǎn】在37°C水浴中迅速【sù】摇晃【huǎng】解冻，加【jiā】入【rù】4mL培【péi】养基【jī】混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，补加l-2mL培【péi】养【yǎng】基后吹匀。然后【hòu】将所有【yǒu】细胞悬液加入培养【yǎng】瓶中【zhōng】培养过【guò】夜（或将 细胞悬液加入【rù】l〇cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第【dì】二天换液并【bìng】检 查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人涎腺癌细胞(ACC-M)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃【qì】去培养上清，用不含钙【gài】、镁【měi】离子的PBS润洗细胞9-21次。力口 2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中，置于37°C培【péi】养箱中消【xiāo】化9-21分【fèn】钟，然后【hòu】在显微镜【jìng】下观察【chá】细胞消【xiāo】化情况，若细【xì】胞【bāo】大部【bù】分变圆并脱【tuō】落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加【jiā】少量培养基【jī】终【zhōng】止 消化。按6-8ml/瓶补加【jiā】培养基，轻【qīng】轻打匀后【hòu】吸【xī】出，在【zài】1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上清液【yè】，补加【jiā】l-2mL培养液后吹匀。将细胞【bāo】悬液按【àn】1: 2到【dào】1: 5的比例分到新的含8ml培养【yǎng】基的新皿中或者瓶中。
 
细胞冻存：待细胞【bāo】生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴【tiē】壁【bì】细【xì】胞【bāo】冻存【cún】时，弃去培养【yǎng】基后加入少量【liàng】胰酶，细胞【bāo】变圆脱落【luò】后，加入约lml含血清的培养基后加入冻【dòng】存【cún】管中，再添加【jiā】1〇%DMSO后【hòu】进行冻存【cún】。
 
注意事项：
收到细胞后，若【ruò】发现干【gàn】冰己挥发干净【jìng】、冻存管瓶盖脱落、破损及【jí】细胞【bāo】有污染【rǎn】，请立即【jí】与我们电【diàn】联。
所【suǒ】有动【dòng】物细胞均视为有潜【qián】在【zài】的生物【wù】危害【hài】性，必须在二级生物安【ān】全台内操作，并请注意防护，所有废液及接【jiē】触过【guò】此【cǐ】细胞的器皿需要灭菌【jun1】后方能丢弃。
 
细胞特性：
1)来源：人涎腺癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人涎腺癌细胞(ACC-M)运输和保存：使用含有胎牛血清【qīng】的2ml冻存管发【fā】送存活细胞。收到细胞后，可在1000RPM，常温条件【jiàn】下，离心【xīn】5min后，于洁净操作台弃去【qù】上清，加【jiā】入推【tuī】荐使用的培养基后转移【yí】至l〇cm培【péi】养皿或者T25培【péi】养瓶【píng】中培养，传代【dài】达【dá】到【dào】细胞生长状态良好时，再进行【háng】冻存。具体操作见细胞【bāo】培养步骤。
细胞用途：仅供使用。