人肾癌细胞 （A498）

人肾癌细胞 (A498)
细胞介绍：
该细【xì】胞【bāo】系由Aaronson S建【jiàn】立，源自一位52岁患有肾癌的女性病人。
  
细胞培养步骤：
1)培养基及培养冻存条件准备：
1. 准备MEM培养基(MEM:GIBCO  90%;胎牛血清，10%。
2.培养条件：气【qì】相：空气，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3. 冻存液：90%*培【péi】养基，10%DMSO,现【xiàn】用现配。液【yè】氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞【bāo】：将含【hán】有【yǒu】lmL细【xì】胞悬液的冻存管在37°C水浴【yù】中迅速摇晃解【jiě】冻，加入4mL培养【yǎng】基混合均匀。在【zài】1000RPM条件下离心4分钟，弃【qì】去上清【qīng】液，补【bǔ】加l-2mL培【péi】养【yǎng】基后吹【chuī】匀。然【rán】后将所有细胞【bāo】悬液加入培养瓶中培养过夜【yè】（或将细胞悬液加【jiā】入l〇cm皿中，加【jiā】入约8ml培养【yǎng】基，培养过夜）。第二天换液并检查细【xì】胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
人肾癌细胞 (A498)对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去【qù】培养上清，用不含钙【gài】、镁离【lí】子【zǐ】的PBS润洗细【xì】胞9-20次【cì】。力口【kǒu】2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中【zhōng】，置于37°C培养箱【xiāng】中【zhōng】消化【huà】9-20分钟，然后在显微镜下观察【chá】细胞【bāo】消化【huà】情况，若细胞【bāo】大部 分变圆并【bìng】脱落，迅速【sù】拿回操作台，轻【qīng】敲几下培养【yǎng】瓶后加【jiā】少量【liàng】培养【yǎng】基终止消化。按【àn】6-8ml/瓶补加【jiā】培养基，轻轻【qīng】打【dǎ】匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分 钟【zhōng】，弃去上清液，补加l-2mL培养液【yè】后吹匀。将【jiāng】细胞悬液按1: 2到1: 5的比例分【fèn】到新的含8ml培养基的新皿【mǐn】中。
 
细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴壁细【xì】胞冻存时，弃去培养【yǎng】基后加【jiā】入少量【liàng】胰酶，细【xì】胞变【biàn】圆【yuán】脱落【luò】后，加入【rù】约lml含血清的培养基后 加【jiā】入冻【dòng】存管【guǎn】中，再添加1〇%DMSO后进行【háng】冻存。
 
注意事项：
收到细【xì】胞后，若发现干冰【bīng】己挥发干净、冻存管瓶【píng】盖【gài】脱落、破损及细胞【bāo】有污染，请【qǐng】立 即与我们电【diàn】联。
所【suǒ】有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必【bì】须在二级生物安全【quán】台内操【cāo】作，并请【qǐng】注意防护，所有【yǒu】废液【yè】及接触【chù】过【guò】此细胞的器皿需要灭【miè】菌后【hòu】方能【néng】丢弃瓶中。
 
细胞特性：
1)来源：肾癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06 个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
人肾癌细胞 (A498)运输和保【bǎo】存：可选择干【gàn】冰【bīng】运输及发送复苏存活细【xì】胞方式：（1)干【gàn】冰【bīng】运输，收【shōu】到【dào】后立即转入液氮冻存或直【zhí】接复苏；（2)存活细胞，收到后应继续【xù】生长，传【chuán】代达到细 胞生长状态良好时，再进行冻存。具体操【cāo】作【zuò】见细【xì】胞培养【yǎng】步【bù】骤。
细胞用途：仅供使用。