小鼠白血病细胞（P388）

小鼠白血病细胞(P388)
细胞特性
1)来源：小鼠
2)形态：圆形，悬浮生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保【bǎo】存：使用含有胎牛血清的2ml冻存管【guǎn】发送存活细胞。收到细【xì】胞后，可在1000RPM，常【cháng】温条件下【xià】，离心5min后，于洁净操作台弃【qì】去上清【qīng】，加入【rù】推荐 使用的培养基【jī】后转移至l〇cm培养皿或者T25培养【yǎng】瓶中培养，传代达到细【xì】胞【bāo】生长状【zhuàng】态良好时【shí】，再进【jìn】行冻【dòng】存【cún】。具体操【cāo】作见细胞培【péi】养步【bù】骤。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠白血病细胞(P388)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640培养【yǎng】基(RPIVM-1640:GIBCO,添加 NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八，丙酮酸钠O.llg八【bā】)，90%;马血清，10%。
2.培养条件：气相：空【kōng】气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱 湿度【dù】为70%-80%。
3.冻【dòng】存液：90%*培养基【jī】，10%DMSO,现用现配。液氮储【chǔ】存。
 
2)细胞处理：
复【fù】苏细胞：将【jiāng】含【hán】有lmL细【xì】胞悬液的冻存管在37°C水【shuǐ】浴【yù】中迅速摇晃【huǎng】解冻，加入【rù】4mL培养基混合均匀。在1000RPM条【tiáo】件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，补加【jiā】l-2mL培养基后【hòu】吹匀。然【rán】后将所【suǒ】有【yǒu】细胞悬液加【jiā】入培养瓶中培【péi】养过【guò】夜【yè】（或将细胞悬液加入l〇cm皿中，加入约8ml培【péi】养基【jī】，培养过夜）。第二【èr】天换液【yè】并检 查细胞密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一【yī】：收集【jí】细胞，1000RPM，常温条件下离【lí】心5分钟，弃去上清液，补加 l-2mL培养液后吹句【jù】，将细胞悬【xuán】液按【àn】1: 2到1: 5的比例【lì】分到新的含8ml培 养基的新皿【mǐn】中或【huò】者瓶中。
方法二【èr】：可选择半数【shù】换液方式【shì】，弃【qì】去半数培养基后，将剩余细胞悬起【qǐ】，将细胞悬液【yè】按【àn】1: 2到【dào】1: 3的比【bǐ】例分到新的含8ml培养基的新皿中【zhōng】或者瓶中。
细胞【bāo】冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细【xì】胞冻存。悬浮细胞冻存【cún】时【shí】，应将细胞【bāo】收集，1000RPM，常温条件下离【lí】心5分钟，少量保存上【shàng】清液（防止细胞吸走【zǒu】)，加【jiā】入部分新鲜培【péi】养基，吹打均【jun1】匀【yún】后【hòu】，加入【rù】到冻存管中【zhōng】，在冻存【cún】管【guǎn】中加入10%DMSO摇匀后进行冻存【cún】。
 
小鼠白血病细胞(P388)注意事项：
收到细胞后，若发现干【gàn】冰己挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破【pò】损【sǔn】及细胞【bāo】有污染，请立即与【yǔ】我【wǒ】们电联【lián】。
所【suǒ】有动物【wù】细胞【bāo】均【jun1】视为有潜【qián】在的生物危害性，必须在二【èr】级生物安全台内操作，并请注【zhù】意【yì】防护，所有废液及接触过此【cǐ】细胞【bāo】的器皿需要灭菌后方能【néng】丢弃【qì】。