小鼠肺上皮细胞（TC-1）

小鼠肺上皮细胞(TC-1)
细胞介绍
该细胞【bāo】为HPV16E6、E7和【hé】ras基因【yīn】共转化的【de】C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮细胞。
 
细胞特性
1)来源：小鼠肺
2)形态：上皮细胞样，贴壁生长
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
细胞接受后的处理：
1.收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
2.请【qǐng】先在显【xiǎn】微【wēi】镜【jìng】下确【què】认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37°C培养约【yuē】 2-3h〇
3.弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的*培养基。
4.如【rú】果细胞长满（90%以上【shàng】）请及【jí】时进行【háng】细胞【bāo】传代，传代培养用6ml本【běn】公【gōng】司附 带的*培养基。
5.接到细胞次日【rì】，请检【jiǎn】查细胞是否污染【rǎn】，若发【fā】现污染或疑【yí】似【sì】污染，请及时与我 们取得电联【lián】。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠肺上皮细胞(TC-1)本公司的细胞培养操作规程，供参考
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备DMEM培养基(DMEM，GIBCO)，90%;胎【tāi】牛血清，10%。
2. 培【péi】养条件：气相：空气，95%;二氧【yǎng】化碳，5%。温度【dù】：37°C，培养箱湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
2)细胞处理：
复苏细胞：将【jiāng】含有lmL细胞悬液的冻存【cún】管迅速放入37°C水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事【shì】先准备好的【de】含有【yǒu】4mL培养基的【de】15ml离【lí】心管中混合【hé】均匀。在【zài】1000RPM条件【jiàn】下离心4分钟，弃去上【shàng】清液，加入lmL培养【yǎng】基后吹匀。然后将所【suǒ】有细胞悬液移入含有【yǒu】5ml培养基【jī】的培养瓶中培【péi】养【yǎng】过夜【yè】。 第二天换【huàn】液并检【jiǎn】查细胞密【mì】度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-21次。
力口2m丨消化液（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于【yú】培养瓶【píng】中，置于【yú】37°C培
养箱中消【xiāo】化9-21分钟，然后在显微镜下【xià】观【guān】察细胞【bāo】消【xiāo】化情况，若细胞大部【bù】分【fèn】变圆【yuán】并脱落，迅速拿【ná】回操作台，轻【qīng】敲几下培养瓶后加入3ml此【cǐ】细胞的培养基终止消化【huà】。
轻轻吹打后吸出【chū】，移入15ml离心管【guǎn】中，在1000RPM条件【jiàn】下离心【xīn】4分钟，弃【qì】去上清液，加【jiā】入lmL培养液后吹匀。
移入到事先准备好的含有5ml培【péi】养【yǎng】基的T-25培养瓶【píng】中或【huò】含有【yǒu】14ml培养基的T-75培养瓶【píng】中培养。
 
细胞冻存：待【dài】细胞生长状态良好时，可进行【háng】细胞冻存。贴【tiē】壁细【xì】胞冻存时，先【xiān】要消化处理并进行细胞【bāo】计数。消化【huà】方法按照细【xì】胞传代方法【fǎ】的9-21步骤【zhòu】进行， 后的【de】重悬液使【shǐ】用血清【qīng】。悬浮细【xì】胞【bāo】直接计数后离心，用血清重悬浮，加DMSO至终浓度为10%。加入DMSO后迅【xùn】速【sù】混【hún】匀【yún】，按每lml的数量【liàng】分配【pèi】到冻存管 中。本公司按每个冻存管细胞数目大于【yú】1X106个细胞冻存。
 
小鼠肺上皮细胞(TC-1)注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现干【gàn】冰【bīng】己【jǐ】挥发干净、冻【dòng】存管【guǎn】瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们电联【lián】。
所有动【dòng】物细胞均视【shì】为有潜在的生物危害性，必【bì】须在二级【jí】生物【wù】安全台内操作，并【bìng】请注意防护，所有废液及【jí】接触过此细胞的【de】器皿【mǐn】需要【yào】灭菌后方能丢弃。