小鼠胃癌细胞 （MFC）

小鼠胃癌细胞 (MFC)
细胞特性
1)来源：小鼠胃癌
2)形态：上皮细胞样
3)含量：>lxl06个/mL
4)污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
5)规格：T25瓶或者lmL冻存管包装
 
运输和保存：使用含【hán】有胎牛血【xuè】清的2ml冻存【cún】管发送存【cún】活细胞。收【shōu】到细胞后【hòu】，可在1000RPM，常温条件下，离心5min后，于洁净操作【zuò】台弃去上清，加入推荐 使用【yòng】的培养基【jī】后转移至l〇cm培养皿或者T25培【péi】养瓶中培养，传代达到细胞生长状态良【liáng】好时【shí】，再进行冻存【cún】。具【jù】体操【cāo】作见细胞培养步骤【zhòu】。
细胞用途：仅供使用。
 
小鼠胃癌细胞 (MFC)细胞培养步骤
1)培养基及培养冻存条件准备：
1.准备 RPIVM-1640培养【yǎng】基(RPIVM-1640:GIBCO,添加NaHC031.5g八, D-葡萄糖2.5g八【bā】，丙酮酸【suān】钠【nà】O.llg八)，90%;胎牛血清【qīng】，10%。
2.培养【yǎng】条件：气【qì】相：空气，95%;二氧化碳，5%。温度：37摄氏度，培养箱 湿度为70%-80%。
3.冻存液：90%*培【péi】养基【jī】，10%DMSO,现用现配。液氮储存。 
2)细胞处理：
复【fù】苏细【xì】胞：将含有lmL细胞【bāo】悬液的【de】冻存【cún】管在37°C水浴中迅速摇晃解冻【dòng】，加【jiā】入4mL培养【yǎng】基混合均匀。在1000RPM条件下离心【xīn】4分钟，弃去上清液，补加l-2mL培养基后吹匀【yún】。然后将所有细【xì】胞悬液加入培养【yǎng】瓶【píng】中培养过夜（或将【jiāng】细胞悬液【yè】加入l〇cm皿中，加入约8ml培【péi】养基，培养【yǎng】过夜）。第二【èr】天换【huàn】液并检 查细胞【bāo】密度。
细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
 
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞9-20次。
力【lì】口2m丨消化液【yè】（0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶【píng】中，置于37°C培
养【yǎng】箱中消化9-20分【fèn】钟，然后在【zài】显微镜下观察细【xì】胞消【xiāo】化情况，若【ruò】细胞大部 分变【biàn】圆并脱落，迅速拿回【huí】操【cāo】作台，轻敲几下培【péi】养瓶后加少量培养基终止消化。
按6-8ml/瓶【píng】补加培养基【jī】，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离【lí】心4分钟，弃去上清液【yè】，补加l-2mL培养液【yè】后吹【chuī】匀。
将【jiāng】细胞悬液按1: 2到【dào】1: 5的比例【lì】分到新【xīn】的含8ml培养【yǎng】基的新皿【mǐn】中或者瓶中。
 
细胞冻存：待【dài】细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去【qù】培【péi】养【yǎng】基【jī】后加入少【shǎo】量【liàng】胰【yí】酶，细胞变圆【yuán】脱落后，加入【rù】约lml含血清【qīng】的【de】培【péi】养基后加【jiā】入冻存管中，再【zài】添加1〇%DMSO后进行冻存。
 
小鼠胃癌细胞 (MFC)注意事项：
收到细胞【bāo】后，若发现干冰【bīng】己挥发干净、冻存管瓶盖脱【tuō】落、破损及细【xì】胞【bāo】有污染，请立即与我们电联【lián】。
所有【yǒu】动【dòng】物细胞均视为【wéi】有潜在【zài】的【de】生物危害性，必须在二级生物安【ān】全台内操作，并请【qǐng】注意防护，所有【yǒu】废液及接触过【guò】此细【xì】胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。