产品时间:2024-9-20
我司产品【pǐn】非洲猪瘟病毒PCR检【jiǎn】测【cè】试剂盒正品有保障,免费【fèi】送【sòng】货上门,和各大快【kuài】递【dì】公司都有合作,保证发【fā】货【huò】及时,运输无忧有质量问题,可随时【shí】免费包【bāo】退换!我司全【quán】体员工不断【duàn】的为国【guó】内【nèi】事业单位以及【jí】高校等提供的产品服务【wù】!本公司具有质量可靠,灵【líng】敏度好【hǎo】,更【gèng】有免费提【tí】供技术指导【dǎo】服务,欢迎者来【lái】函洽谈!
产品介绍:
产品名称:非洲猪瘟病毒PCR检测试剂盒
英文名称:African Swine Fever Virus(ASFV)PCR
准备物品:
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升【shēng】
稀释液【yè】(C) 毫升
溶解液【yè】(tD) 毫升
产品说明书 1份【fèn】
注意事项:
1.基础程序;
2.扩增温度和延伸温度;
3.反应时间;
4.循环次数;
5.PCR 反应液的配制;
6.PCR技术的基本原理;
7.PCR的反应动力学;
8.PCR扩增产物;
9.PCR反应体系与反应条件。
反应五要素:
参【cān】加PCR反【fǎn】应的物质主要有五种【zhǒng】即引【yǐn】物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,非洲猪瘟病毒PCR检测试剂盒PCR 产物的特异性取决于引【yǐn】物【wù】与模板DNA互补的程度【dù】。理【lǐ】论【lùn】上,只【zhī】要知道任何一段模板【bǎn】DNA序列, 就【jiù】能按其设计【jì】互补的寡核【hé】苷酸链做引物,利【lì】用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增【zēng】。设计引【yǐn】物应【yīng】遵循以【yǐ】下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜【yí】,特【tè】定【dìng】条件【jiàn】下可【kě】扩增长至10kb的片【piàn】段。
③引【yǐn】物碱基:G+C含量以9-20%为宜,G+C太少扩增效果不【bú】佳,G+C过多易【yì】出现非特异条带。ATGC*随【suí】机分【fèn】布,避免5个以【yǐ】上的【de】嘌呤或嘧啶核【hé】苷酸的成串排列。
④避免引物【wù】内【nèi】部出现【xiàn】二【èr】级【jí】结构,避免两【liǎng】条引物间互补,特别是3'端【duān】的互补,否则会【huì】形成引物二聚体,产【chǎn】生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避【bì】免【miǎn】因【yīn】末端碱【jiǎn】基【jī】不配对【duì】而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点【diǎn】, 被【bèi】扩增【zēng】的靶序列【liè】*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析【xī】或【huò】分子克隆很有【yǒu】好【hǎo】处【chù】。
⑦引物的特异性:引【yǐn】物应与核酸序列数据库的其它序【xù】列【liè】无明显同【tóng】源【yuán】性。
引【yǐn】物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生【shēng】所需要【yào】的【de】结【jié】果为好,引物浓度偏高会引起错配【pèi】和非特异性扩【kuò】增【zēng】,且可增加引物【wù】之【zhī】间形【xíng】成二聚体【tǐ】的机会【huì】。
相关产品