米黑根毛霉PCR检测试剂盒

产品介绍：

产品名称：米黑根毛霉PCR检测试剂盒

英文名称：Rhizomucor mieheiPCR

组成及试剂配制:

1、 酶标板：一块（96孔）

2、 标准品（冻干品【pǐn】）： 2瓶【píng】，请临用前【qián】15分钟内配制。每瓶【píng】以样品稀释液稀释【shì】至0.5ml，盖好后室【shì】温【wēn】静【jìng】置大【dà】约【yuē】10分钟【zhōng】，同【tóng】时反复颠【diān】倒/搓动以助溶解，其【qí】浓度为200 U/L，然【rán】后做系列【liè】倍【bèi】比稀释（注：不要直接在板中进行【háng】倍【bèi】比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释【shì】液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标【biāo】准品：取0.3ml （不要少于【yú】0.3ml ）200 U/L的上述【shù】标准品加入含有0.3ml样品【pǐn】稀释液的【de】Eppendorf管中【zhōng】，混【hún】匀即可，其余浓度以此类推。

3、 样品稀释液：1×20ml。

4、 检测稀释液A：1×10ml。

5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集。

2、米黑根毛霉PCR检测试剂盒存放：样【yàng】本在2~8℃条件下【xià】保存应不【bú】超过72h，-70℃以下可长【zhǎng】期保存，但应避免【miǎn】反复【fù】冻融（zui多冻融3次）。

3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。

特点优势：

1.特【tè】异【yì】性：所有【yǒu】产品使用的引物均经过详尽【jìn】的【de】生物【wù】信息【xī】学【xué】分析，经过GenBank及自建庞大数据【jù】库的比【bǐ】对【duì】，确保【bǎo】所用的【de】每一条引物均为种属或血清【qīng】型【xíng】特异的基因序列区段，可实现对种属【shǔ】及血清型的特异检测，特异性【xìng】均达到100%。

2.重现性：该系【xì】列【liè】所有产品均经过大【dà】量【liàng】实验菌株的验证，重【chóng】现性为【wéi】100%。

3.灵敏【mǐn】性：该系列产品可实现对检测【cè】菌的【de】高灵敏【mǐn】检【jiǎn】测，当样品中的浓【nóng】度达【dá】到103cfu/ml时，可实现【xiàn】对其【qí】的直接检测，无需繁琐的增菌过程。

4.实用性：检测范【fàn】围广，涵盖了对人体危【wēi】害较为严重的17种【zhǒng】呼吸道及肠道【dào】致【zhì】病菌，可实现对临床样品【pǐn】及其他环境【jìng】取样【yàng】的快速检测，整个检测过【guò】程【chéng】为9-21个小时【shí】。

5.优【yōu】势【shì】1：序列资【zī】源【yuán】丰富，除GenBank公【gōng】布的序列【liè】外，公司还进行【háng】了大量菌株的序列【liè】破译，从理【lǐ】论上保证所选引物具有良好的保守性和特【tè】异性。

6.优势2：该系列试剂盒均【jun1】经过大【dà】量的保守性及特异性实验【yàn】验证，凭借公司拥有的丰富的菌种资源，每一【yī】种检【jiǎn】测试剂盒【hé】均经【jīng】过了20余种标准菌【jun1】株【zhū】和临【lín】床菌株的保【bǎo】守【shǒu】性验【yàn】证及40余种近缘标准菌【jun1】株和临床菌株的特【tè】异【yì】性验【yàn】证，确保在使用【yòng】过程中【zhōng】不会出现任【rèn】何的【de】假阳性【xìng】及假阴性报告结【jié】果。

使用方法：

注：所有试剂使用前需*解冻【dòng】，混合【hé】均匀，6,000rpm离心数【shù】秒【miǎo】后使用。

1. 样本处理（样本处理区）

待检样本【běn】的【de】核酸提取可采【cǎi】用病毒RNA提取试剂盒或自动化【huà】核酸提取仪等，具体提取方法请【qǐng】参照相关【guān】说明书。阳性质【zhì】控品及阴性【xìng】质控【kòng】品无需【xū】提取【qǔ】，可直接【jiē】使用【yòng】。

2. 扩增试剂准备（PCR前准备区）

取N个（N=阴【yīn】性质控【kòng】品【pǐn】+待检样本+阳性质控品【pǐn】）PCR反应管，每管分别加入FMD RT-PCR反应液【yè】19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量【liàng】计算N+1份FMD RT-PCR反【fǎn】应液、RT-PCR酶所需总量，两者混匀离【lí】心后分装20 μl至单个PCR反【fǎn】应管【guǎn】)。组分每头份用量【liàng】FMD  RT-PCR反应液【yè】19 μlRT-PCR酶。

1 .将所【suǒ】有PCR反应管【guǎn】于6,000rpm离心30s，转移至样本【běn】处理区。

2.米黑根毛霉PCR检测试剂盒加样（样本处理区）

3.在上述的【de】PCR反应管中【zhōng】分别加入【rù】待检样本【běn】RNA提取物、阴性质控品【pǐn】和阳性质【zhì】控品各【gè】5 μl，盖紧管盖，于6,000rpm离心10s，转移【yí】至【zhì】扩增区。