随着分子生物学和细胞生物学研究的【de】不断发展【zhǎn】，转染已【yǐ】经【jīng】成【chéng】为研究和控制【zhì】真核【hé】细胞基因功能的常规工具。细【xì】胞转染实验是现代生【shēng】物学研究中的重要技术手段之一。通过将外源【yuán】DNA、RNA、蛋白质等【děng】引入目标细胞的实【shí】验技术【shù】之一，研究者们可以揭示细【xì】胞【bāo】的基因【yīn】功能、蛋白【bái】质表达和【hé】相【xiàng】互作【zuò】用，进而深入理解细胞生理过程和疾病发生机制【zhì】。接【jiē】下来【lái】我来为大家介绍一下常见的【de】细胞【bāo】转染方法【fǎ】吧【ba】

1.化学物质介导：磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法

1）磷酸【suān】钙共沉【chén】淀法：借助【zhù】于【yú】形成一【yī】种【zhǒng】DNA-磷酸【suān】钙复合物沉【chén】淀【diàn】黏附在【zài】细胞膜【mó】表面，通过细胞的内【nèi】吞作用而使【shǐ】DNA被细胞捕获【huò】。沉淀颗粒的大【dà】小和质量对于转染的成功至关重要，也受【shòu】pH值、钙【gài】离子浓度、DNA浓度、沉淀反【fǎn】应时间、细胞孵育时间等因【yīn】素影响。可适【shì】用于稳转瞬转，操作简便花【huā】费相【xiàng】对较低，但转染效率低，9-21%，并【bìng】且重复【fù】性很差。

2）脂质【zhì】体转染：带正电的脂质体与带负【fù】电【diàn】的核【hé】酸【suān】磷酸基团形成DNA-阳离子脂质体复合物，再【zài】与细胞膜【mó】上的唾液酸残【cán】基的负电核结合，可能经过内【nèi】吞作用被导入细【xì】胞。该【gāi】方法使用简【jiǎn】单，可携带大片段【duàn】DNA，通用于【yú】各种类型的【de】裸露【lù】DNA或RNA，能转染各种【zhǒng】类型的细胞，转染效率【lǜ】、转【zhuǎn】染的稳定性和可重复性【xìng】大大提【tí】高。但【dàn】转【zhuǎn】染时需要去除血清，血清的缺失会导致细胞毒【dú】性增加；转染效果【guǒ】也【yě】随细胞类型【xíng】变化大。

2. 物理物质介导：电穿孔法、显微注射

1）电穿孔【kǒng】法：电穿孔是通过高强【qiáng】度的【de】电场作用破坏细胞膜电位，瞬时【shí】提高细胞膜的通透性，从而【ér】吸收周围【wéi】介质中的外源分【fèn】子【zǐ】。电穿【chuān】孔法可适用【yòng】于所【suǒ】有细胞类型的瞬时和稳定转染，但是其【qí】高【gāo】电【diàn】压脉冲导致细胞致死率非常高，并且对【duì】DNA和细【xì】胞【bāo】的用量很大【dà】。

2）显微注射：需要使用【yòng】精密的仪【yí】器，直接将外源性【xìng】核酸注射至宿主细胞核内【nèi】。多【duō】用【yòng】于转基因【yīn】，由宿主基因组序列可【kě】能发生的【de】重【chóng】组，缺失【shī】，复制或者异【yì】位等【děng】现象使外源基因【yīn】嵌入宿主的【de】染色体中。但是【shì】转染细胞数有限,多用【yòng】于工程【chéng】改造或转基【jī】因动物的胚胎细【xì】胞。

3. 生物物质介导：病毒介导法

1）逆转录【lù】病毒(RNA)：通过病毒侵【qīn】染宿主细胞的机制将【jiāng】外源基因整合到宿主细胞【bāo】的染色体中【zhōng】，导【dǎo】致基【jī】因失【shī】活或激活癌基因，构建稳转株。可以用于难转染的细胞【bāo】，原【yuán】代【dài】细胞，体内细胞等，但携带基【jī】因不能【néng】太【tài】大（<8kb）:,需【xū】考虑安【ān】全因素。

2）腺病毒(双链【liàn】DNA)：腺病毒除了卵细胞以外几乎在所有已【yǐ】知细胞中都不整合到【dào】染【rǎn】色体【tǐ】中【zhōng】，因此不会干扰其【qí】它的【de】宿主基因。瞬时表达，可以包装8kb左右外源基因，转【zhuǎn】染较容易【yì】，但是转【zhuǎn】染效率不【bú】高。

细胞转染实验作为一种重要的实验手段，为我们探索细胞内的奥秘提【tí】供了有效的【de】工具【jù】。根据实验需求和细胞【bāo】特性，选【xuǎn】择合适的转【zhuǎn】染【rǎn】方法非常重要。像细胞【bāo】状态和密度【dù】、培养【yǎng】基、载体大小【xiǎo】等多方面因【yīn】素都会影响到我们最后的转染效率，所以【yǐ】细【xì】胞转染【rǎn】是一个常见但是却并不简单的实验。