人番茄红素（Lycopene）酶联免疫分析试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围：  96T

18pg/ml-500pg/ml

使用目的：

本【běn】试剂盒【hé】用于测定人血【xuè】清、血【xuè】浆及【jí】相关液体样本中番茄红素【sù】（Lycopene）含量。

人番茄红素（Lycopene）酶联免疫分析试剂盒使用说明书实验原理

本试剂【jì】盒应用双抗体【tǐ】夹心法【fǎ】测【cè】定【dìng】标【biāo】本中人番茄红素（Lycopene）水平。用纯化【huà】的人番茄【qié】红素（Lycopene）抗体包被微孔板，制成固【gù】相抗【kàng】体，往包被单抗的微孔中依次【cì】加【jiā】入番茄【qié】红素（Lycopene），再与HRP标记【jì】的番茄红素（Lycopene）抗【kàng】体结【jié】合，形成抗体-抗【kàng】原-酶标抗体复合物，经过【guò】*洗涤后加底物TMB显色【sè】。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化【huà】成【chéng】终的。颜色的【de】深浅和样品中的番茄红素【sù】（Lycopene）呈正相关。用【yòng】酶标【biāo】仪在450nm波长【zhǎng】下测定【dìng】吸【xī】光度（OD值），通过标准曲线计算样品中【zhōng】人番茄红素【sù】（Lycopene）浓度。

试剂盒组成

标本要求 

1．标本采集后尽早进行【háng】提【tí】取，提【tí】取按【àn】相关【guān】文【wén】献【xiàn】进行，提【tí】取后应尽快进行实【shí】验。若不能马上进【jìn】行试验，可将标本【běn】放于-20℃保存，但应避免反【fǎn】复冻融

2．不能检测含NaN3的样【yàng】品，因NaN3抑制【zhì】辣根过氧化物酶【méi】的（HRP）活【huó】性。

人番茄红素（Lycopene）酶联免疫分析试剂盒使用说明书操作步骤

标【biāo】准品的【de】稀释【shì】：本试剂盒提供原倍标【biāo】准品一支，用【yòng】户可按【àn】照下列【liè】图表在小试管中【zhōng】进行稀释。

加样：分【fèn】别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂【jì】，其余各步操作【zuò】相同）、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板【bǎn】上【shàng】标准【zhǔn】品准确【què】加样50μl，待测样【yàng】品孔中【zhōng】先加样品稀释液40μl，然【rán】后再加待测样品10μl（样品终【zhōng】稀【xī】释度为5倍）。加样将【jiāng】样品加于酶【méi】标板【bǎn】孔底部，尽量【liàng】不【bú】触及【jí】孔壁，轻轻晃动混【hún】匀【yún】。

温【wēn】育：用【yòng】封板膜封板后【hòu】置37℃温【wēn】育30分钟。   
配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤：小心【xīn】揭掉封板膜【mó】，弃【qì】去【qù】液体，甩【shuǎi】干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复【fù】5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
温育：操作同3。
洗涤：操作同5。
显色【sè】：每孔【kǒng】先加入显【xiǎn】色剂A50μl，再加入显【xiǎn】色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光【guāng】显【xiǎn】色10分钟【zhōng】.
终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转）。
测定【dìng】：以空【kōng】白空调零，450nm波长依序【xù】测量各孔的吸光度【dù】（OD值【zhí】）。 测定应在加终【zhōng】止液后15分钟以【yǐ】内进行。

操作程序总结：

计算

  以标准物的【de】浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在【zài】坐标纸上绘【huì】出标准曲线，根据样品的OD值由标准【zhǔn】曲线【xiàn】查出【chū】相应【yīng】的浓【nóng】度；再【zài】乘以【yǐ】稀释倍数；或用标准【zhǔn】物的浓度【dù】与OD值计算出标【biāo】准曲线的直【zhí】线回【huí】归方程【chéng】式，将样品的OD值代【dài】入【rù】方程式，计算出样品浓度，再乘【chéng】以【yǐ】稀释倍数，即为样【yàng】品的实际浓度【dù】。

人番茄红素（Lycopene）酶联免疫分析试剂盒使用说明书注意事项

1．试【shì】剂盒从冷藏环境中取【qǔ】出【chū】应在室温平衡9-21分钟后方可使用，酶标包被板【bǎn】开封后如未用完，板条应装【zhuāng】入【rù】密封袋中【zhōng】保存。

2．浓洗涤液可能会有结晶析出【chū】，稀释【shì】时可在水浴中加温助溶，洗涤时【shí】不影响结【jié】果【guǒ】。

3．各步加【jiā】样均应使用【yòng】加样器，并经常校对其准确【què】性，以避【bì】免试验【yàn】误【wù】差。一次加样时间控【kòng】制在5分钟【zhōng】内【nèi】，如标本数量【liàng】多，推荐使用排【pái】枪【qiāng】加样。

请每次测【cè】定的同时做标准曲线，做复孔。如标本中待测物质【zhì】含量过【guò】高（样本OD值大【dà】于标准品孔孔的OD值），请先用【yòng】样品稀释液稀释一定【dìng】倍【bèi】数（n倍）后再测定，计【jì】算时请后乘【chéng】以总稀【xī】释【shì】倍数（×n×5）。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格按照说明书的操【cāo】作进行，试【shì】验结果判定【dìng】必须以酶标仪【yí】读【dú】数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；9-21℃。

2．有效期：6个月