兔晶体蛋白α抗体IgG (CryαIgG)酶【méi】联免【miǎn】疫【yì】分析试剂盒使用说明书

本试剂盒仅供研究使用。

检测范围： 96T

30pg/ml - 800pg/ml

使用目的：

本试剂盒用于测【cè】定兔血清、血浆及【jí】相【xiàng】关液体【tǐ】样本中晶体蛋白α抗【kàng】体IgG (CryαIgG)含量。

兔晶体【tǐ】蛋【dàn】白【bái】α抗体IgG (CryαIgG)酶联免疫分析试剂盒使用说明书实验原理

本试剂盒应用【yòng】双抗原夹心法测定标本中兔晶【jīng】体蛋白α抗体IgG (CryαIgG)水平。用纯化的抗原包被微【wēi】孔板，制成固相抗原，往包被单抗的【de】微孔【kǒng】中依次加入【rù】晶体蛋白α抗体【tǐ】IgG (CryαIgG)，再与HRP标记的【de】抗【kàng】原结合，形【xíng】成抗原-抗【kàng】体-酶标【biāo】抗原【yuán】复【fù】合物【wù】，经【jīng】过*洗涤后【hòu】加底物TMB显色【sè】。TMB在HRP酶的催化下【xià】转化成【chéng】蓝色，并在酸的作用下转【zhuǎn】化成终的【de】。颜色的【de】深浅和【hé】样品中【zhōng】的晶体蛋白α抗体IgG (CryαIgG)呈【chéng】正【zhèng】相关。用【yòng】酶标仪在450nm波长【zhǎng】下测定吸光度（OD值【zhí】），通过标【biāo】准曲【qǔ】线计算样品中兔晶【jīng】体蛋白α抗体IgG (CryαIgG)浓度。

试剂盒组成

标本要求 

1．标本采【cǎi】集后尽早进行提取，提取按相关文献【xiàn】进【jìn】行，提【tí】取后【hòu】应尽快进【jìn】行实验。若不能马上进行试验，可将标【biāo】本放于-20℃保存，但应避免反复【fù】冻融【róng】

2．不能检测含NaN3的样品，因【yīn】NaN3抑制辣根过氧【yǎng】化物【wù】酶的（HRP）活性。

兔晶体【tǐ】蛋白α抗体IgG (CryαIgG)酶联免【miǎn】疫【yì】分析试剂盒使用说明书操作步骤

标【biāo】准【zhǔn】品的稀释：本试剂盒提供【gòng】原倍标准品一支，用户【hù】可按照下列图【tú】表在小试管【guǎn】中进【jìn】行稀释。

加样【yàng】：分【fèn】别设空白孔（空白对照孔不加样品【pǐn】及【jí】酶标试剂，其余各步【bù】操作相同）、标准孔、待【dài】测样品孔。在酶标包被板【bǎn】上【shàng】标准品【pǐn】准确加样【yàng】50μl，待测样品【pǐn】孔中先加样【yàng】品稀释液40μl，然后再【zài】加待【dài】测样品【pǐn】10μl（样品【pǐn】终稀释度为5倍）。加样将【jiāng】样品【pǐn】加于【yú】酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育【yù】：用封板【bǎn】膜封板后置37℃温育【yù】30分钟。   
配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
洗涤：小【xiǎo】心【xīn】揭掉封板膜，弃去液体，甩干【gàn】，每孔【kǒng】加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此【cǐ】重复【fù】5次，拍干【gàn】。
加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
温育：操作同3。
洗涤：操作同5。
显色：每【měi】孔先【xiān】加入显色剂A50μl，再加入显色剂【jì】B50μl，轻轻震荡混匀【yún】，37℃避光【guāng】显色15分钟.
终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转）。
测【cè】定【dìng】：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔【kǒng】的吸光【guāng】度（OD值【zhí】）。 测定应在加终止液后15分钟以【yǐ】内【nèi】进行。

操作程序总结：

计算

  以标准物的【de】浓【nóng】度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标【biāo】纸上绘出标准曲线，根据样品的【de】OD值由标准曲线查【chá】出相应【yīng】的【de】浓度【dù】；再【zài】乘以稀释倍数；或用标【biāo】准物【wù】的【de】浓度【dù】与OD值计算出标准曲线的直线回归【guī】方程【chéng】式，将样品的OD值代入方程【chéng】式，计算出样品【pǐn】浓【nóng】度，再乘以稀释倍数，即为【wéi】样品的【de】实际浓度【dù】。

兔晶体蛋白α抗体IgG (CryαIgG)酶联免【miǎn】疫分【fèn】析试剂盒使用说明书注意事项

1．试剂盒从冷藏环境中取出【chū】应在室温平衡9-19分钟后方可使【shǐ】用【yòng】，酶标包【bāo】被板开封后如【rú】未用完【wán】，板条应装【zhuāng】入密封【fēng】袋中保【bǎo】存。

2．浓洗涤液可能会有结晶【jīng】析【xī】出，稀释时可在水【shuǐ】浴中【zhōng】加温助溶，洗涤时不影响【xiǎng】结果。

3．各步加样均应使用加样【yàng】器，并经常校【xiào】对其准【zhǔn】确性，以避免试验误【wù】差。一【yī】次加样时间控制【zhì】在5分钟【zhōng】内，如标【biāo】本数【shù】量【liàng】多，推荐使用排枪加样。

请每次测定的同时【shí】做【zuò】标准曲线，做复孔。如标本中待测物质含量【liàng】过高（样本【běn】OD值大于标准品孔孔的OD值），请先用样品【pǐn】稀释液稀释一定【dìng】倍【bèi】数【shù】（n倍）后再测定，计【jì】算时【shí】请后乘以【yǐ】总稀【xī】释倍【bèi】数【shù】（×n×5）。
封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物请避光保存。

7．严格【gé】按照说【shuō】明书的【de】操作进行，试验结果【guǒ】判定必【bì】须以酶标仪【yí】读数为准.

8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。

9．本试剂不同批号组分不得混用。

10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

保存条件及有效期

1．试剂盒保存：；9-19℃。

2．有效期：6个月