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细胞培养需要什么样的环境
更【gèng】新时间:2024-9-21   点击【jī】次数:1664次
  细胞的培养和环境有着莫大的关系,那么哪些环境才适合细胞的培养呢?
 
  1、无菌环境
 
  无毒和无菌【jun1】是体外【wài】培【péi】养细【xì】胞的首要条件。细胞在活体【tǐ】内【nèi】,解毒系统和免疫系【xì】统可抵抗【kàng】微生物或其他有害物质的入侵【qīn】,但细胞【bāo】在体外培养的【de】过程中,缺乏机体免疫系统的保【bǎo】护而丧【sàng】失对微【wēi】生物的防御能力和对有害物质的【de】解毒能力。为【wéi】保证细【xì】胞【bāo】能在体【tǐ】外【wài】环【huán】境中生长繁殖,必须【xū】要【yào】确保无菌【jun1】工作区域、良好的个人卫【wèi】生、无菌【jun1】试剂和培养基以及无菌操作【zuò】。
 
  常见的微生物【wù】污染【rǎn】有支原体、细菌、真菌。支原体无致死毒性【xìng】,可与细【xì】胞长期共【gòng】存,对细胞有潜【qián】在影【yǐng】响,但体【tǐ】积小,不【bú】易鉴别,可【kě】借助于地衣红或Hoechst33342染色来进行【háng】检【jiǎn】测。细菌【jun1】增殖快,在短时间内即【jí】可大量扩增,并产生【shēng】毒素杀死细胞。真菌的种类繁多,肉【ròu】眼可【kě】见,漂浮于【yú】培养液面上,可呈丝状、管状或树【shù】枝状等。
 
细胞
       2、合适的温【wēn】度【dù】
 
  一般哺乳类与禽类细胞在体外培【péi】养【yǎng】的【de】适宜【yí】温【wēn】度【dù】是【shì】37~38℃,不适宜的【de】环境温【wēn】度会【huì】影响【xiǎng】细胞【bāo】的生长。细胞对低温的耐【nài】受能力要强于对高温的【de】耐【nài】受能力,在【zài】低温下,细【xì】胞的代谢活力及核分裂能力降低【dī】。若温度不低于0℃,虽然细胞代【dài】谢受到影响,但无【wú】损伤作用;25~35℃时【shí】,细胞以缓【huǎn】慢的速度生长;但若被置【zhì】于40℃数小时【shí】,则不仅不利于细胞生存、生长,甚至【zhì】可导【dǎo】致其【qí】死亡。
 
  3、气体环境与pH
 
  细胞的【de】体外培养需要理想【xiǎng】的气体环境,氧气、二氧化碳是细胞生存的必要条件【jiàn】。氧【yǎng】气【qì】参【cān】与细胞的三羧酸循环【huán】,为细胞【bāo】生存【cún】、代谢【xiè】与合【hé】成提【tí】供能量;二氧化碳既是细胞【bāo】的代谢【xiè】产【chǎn】物,是细胞生【shēng】长【zhǎng】的必需【xū】成分,又与维持培【péi】养液的pH有关。大多【duō】数细胞【bāo】适宜的【de】pH范围往往是7.2~7.4。在开放式培养中,以5%的【de】二氧化碳【tàn】气体比例为宜。
 
  4、适宜的渗透压
 
  高渗溶液或【huò】低渗溶液会引起【qǐ】细胞发生褶皱【zhòu】、肿【zhǒng】胀【zhàng】、破裂【liè】。因此,渗透压是体外培养细胞的【de】重要条件之【zhī】一。多数体外培【péi】养的细胞对渗透压都有一定的耐受能力【lì】,实际应用【yòng】中,260~320mmol/L的渗透压可适【shì】用于【yú】大【dà】多数细胞。
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