很多ELISA实验【yàn】新【xīn】手客户都会咨询我司技术能否把全血提取出【chū】来放-70℃条件保存,等实【shí】验开展了(比如一个月【yuè】左右的【de】时间)再离心全血取血清【qīng】或者血【xuè】浆【jiāng】做【zuò】ELISA实验?这种做法【fǎ】我司技术【shù】都【dōu】是持反对建议的。与此【cǐ】同时,也是【shì】明确要求【qiú】我司销售人员在与客户【hù】售前沟通时建议老【lǎo】师【shī】全血样【yàng】本提取【qǔ】好了应该及【jí】时离心出血清或者血浆。并要求-70℃条件下保存,如果一个月左右可以开展实【shí】验可以【yǐ】-20℃保存,期【qī】间不【bú】能反复冻融。至于冻【dòng】存后【hòu】的全血不可【kě】以再提取血【xuè】清、血【xuè】浆样本来【lái】做elisa的具【jù】体原【yuán】因如下:
1.全血冻存后解冻,用常【cháng】规离心方式提【tí】取血清仍然【rán】是可以的,不利的【de】一点是【shì】,伴【bàn】随冻【dòng】融的【de】过程,会出现【xiàn】比较严重【chóng】的溶【róng】血事件。而后提取出来的【de】血清能否做elisa,主【zhǔ】要取决【jué】于溶血程度、你【nǐ】所要【yào】检测的目标蛋白的性质及你实验【yàn】的目的。
2.溶血【xuè】释放的胞内组分往【wǎng】往容易影响本底,甚至出现【xiàn】假阳性;而蛋白酶【méi】的释放【fàng】可能导致目的蛋白的【de】降【jiàng】解影响结【jié】果【guǒ】;目【mù】的蛋白的大小、稳【wěn】定性、特【tè】异【yì】性(相对抗体而言)又影响其自身与酶标板【bǎn】的【de】吸附【fù】、自身降【jiàng】解【jiě】、自身与抗体的结合率等等。以上各种【zhǒng】不确定【dìng】性【xìng】因素存在下【xià】,如果你只是对血清中某种血【xuè】清蛋白做定【dìng】性检测的话,做elisa应该问题不【bú】大;若是定量【liàng】分析的话,从可靠性的角【jiǎo】度【dù】上看,不建议该【gāi】做法【fǎ】。